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PerfectStart? E.coli DNA Quantification Kit

E.coli殘留DNA定量試劑盒

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DH131-01100 rxns10450
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產(chǎn)品詳情介紹

本產(chǎn)品用于對(duì)各類(lèi)生物制品中的E. coli DNA進(jìn)行定量檢測(cè)。

本產(chǎn)品原理為利用在PCR體系中加入熒光探針 (TaqMan或Molecular Beacon等),擴(kuò)增過(guò)程中其熒光量與擴(kuò)增產(chǎn)物量成正比,通過(guò)熒光量的檢測(cè)測(cè)定樣品核酸量。本產(chǎn)品中的E. coli qPCR SuperMix (2×)含PerfectStart Taq熱啟動(dòng)酶 (利用3種單克隆抗體與Taq DNA Polymerase高效結(jié)合,有效地封閉了DNA聚合酶活性,阻止了低溫下的非特異性擴(kuò)增)、針對(duì)E. coli DNA檢測(cè)特殊優(yōu)化的qPCR反應(yīng)緩沖液、dNTPs、PCR增強(qiáng)劑、穩(wěn)定劑。此外,本反應(yīng)液引入了dUTP/UDG系統(tǒng),可在反轉(zhuǎn)錄前降解含U的ssDNA和dsDNA,消除由PCR產(chǎn)物導(dǎo)致的交叉污染。

產(chǎn)品組成

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實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)

線(xiàn)性范圍廣

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以10倍梯度稀釋的E.coli DNA標(biāo)準(zhǔn)品為模板,使用 TransGen 產(chǎn)品進(jìn)行定量檢測(cè)。結(jié)果表明,TransGen 產(chǎn)品具有寬廣的線(xiàn)性范圍


專(zhuān)屬性強(qiáng)

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使用生物制品生產(chǎn)中常用的工程細(xì)胞基因組DNA對(duì)E.coli 檢測(cè)試劑進(jìn)行干擾。結(jié)果表明,干擾組與對(duì)照組重合,未見(jiàn)干擾。


定量限低

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檢測(cè)50 fg/μl,40 fg/μl,30 fg/μl,10 fg/μl,5 fg/μl  E.coli 標(biāo)準(zhǔn)品。30 fg/μl及以上濃度10個(gè)重復(fù)孔的CV值<20%(參考中國(guó)藥典(2015年版):生物樣品定量分析方法驗(yàn)證指導(dǎo)原則),即本試劑盒的定量限為30 fg/μl。


耐用性強(qiáng)

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將不同超聲條件處理后的E.coli DNA質(zhì)粒進(jìn)行10倍梯度稀釋?zhuān)?00 pg/μl - 50 fg/μl )并進(jìn)行檢測(cè)。結(jié)果表明,DNA的碎片化不會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成影響。


穩(wěn)定性強(qiáng)

不同溫度保存

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以10倍梯度稀釋?zhuān)?00 pg/μl - 50 fg/μl )的E.coli DNA標(biāo)準(zhǔn)品為模板,使用經(jīng)不同保存條件處理(4 ℃、 37 ℃保存5天、37 ℃保存2天+4 ℃ 保存3天, - 20 ℃正常保存)的TransGen 產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè), 結(jié)果表明,產(chǎn)品性能不受影響,仍可穩(wěn)定擴(kuò)增。


反復(fù)凍融測(cè)試

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以10倍梯度稀釋?zhuān)?00 pg/μl - 50 fg/μl )的E.coli DNA標(biāo)準(zhǔn)品為模板,使用經(jīng)反復(fù)凍融處理的TransGen 產(chǎn)品進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果表明,產(chǎn)品性能不受影響,仍可穩(wěn)定擴(kuò)增。


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宿主殘留檢測(cè)介紹視頻


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